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活细胞超分辨率成像技术

     尼康新推出的N-SIM显微镜系统可获得传统光学显微镜两倍的分辨率。使用独特的光学科技与制造技术,尼康享誉全球的Eclipse Ti研究级显微镜并配备卓越的CFI Apo TIRF 100x oil物镜(N.A. 1.49),以此为基础又结合了由UCSF(University of California,San Francisco旧金山加州大学)所授权的SIM技术就形成了全新的N-SIM系统。N-SIM在实现超级分辨率的同时还能以0.6秒/帧的时间分辨率实现了业内最高的超分辨率图像获取速度。

 

  |  几近传统显微镜双倍的分辨率      

     结合UCSF授权的“结构化照明显微术(S tructured I llumination M icroscopy)”与尼康声誉卓著的CFI Apo TIRF 100x oil物镜(N.A. 1.49)N-SIM几乎实现了传统光学显微镜两倍的分辨率。

人血管内皮细胞常规图像与N-SIM图像比较

 

  |  时间分辨率0.6秒/帧,业内最快   

      N-SIM提供业内最高的超分辨率图像获取速度,可实现0.6秒/帧2D SIM与1秒/帧3D SIM的时间分辨率,能有效进行活细胞成像。

 
线粒体红色荧光探针标记线粒体的动态图像(3D SIM1/帧)

 

  |  多种成像模式                            

  |  TIRF-SIM/2D-SIM 模式     

      新研发的TIRF-SIM照明技术以相较传统TIRF显微镜更高的分辨率进行全内反射荧光观察(TIRF),可获得细胞膜附近更多的细节信息。

  
TIRF-SIM 图像                               传统TIRF图像      
Plasma membrane of B16 melanoma cell labeled with YFP
Objective: CFI Apochromat TIRF 100x oil (NA 1.49)
Photographed with the cooperation of: Dr. Yasushi Okada, Laboratory for Cell Polarity Regulation, Quantitative Biology Center, RIKEN

  |  3D-SIM 模式                     

      可使用两种3D模式。“Slice 3D-SIM”模式用于300nm Z轴分辨率单层超分辨率成像;“Stack 3D-SIM”模式用于厚样品的序列多层超分辨率成像,具有相对前者更高的对比度。

  
Slice 3D-SIM  图像                       普通显微镜图像 
 
Bacillus subtilis bacterium stained with membrane dye Nile Red (red), and expressing the cell division protein DivIVA fused to GFP (green).
The superior resolution of N-SIM system allows for accurate localization of the protein during division. 
Photos courtesy of: Drs. Henrik Strahl and Leendert Hamoen, Centre for Bacterial Cell Biology, Newcastle University
 
  
 Stack 3D-SIM图像(三维重构)      最大透射图像
 
Mouse keratinocyte labeled with an antibody against keratin intermediate filaments and stained with an Alexa 488 conjugated second antibody.
Photos courtesy of: Dr. Reinhard Windoffer, RWTH Aachen University
 

  |  同时双波长超分辨率成像   

      使用选配的双相机组件*为显微镜链接两台EMCCD相机。可使用488nm与561nm激发光实现同时双波长超分辨率成像。 *Andor Technology Ltd


双相机成像适配器(N-SIM) *产品外观以实物为准。

Growth cone of NG108 cell expressing GFP-LifeAct (F-actin, green) and mCherry-tubulin (microtubules, red)
Photos courtesy of: Dr. Kaoru Katoh, The National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST)

  |  5激光多色成像                          

      LU5 N-SIM 5激光台可装备最多5个激光器提供五种波长进行真正的多色超分辨率成像。多色超分辨率成像能力是研究分子水平多种蛋白相互动态作用的关键技术。

 
有丝分裂中期人类U2OS细胞
标记绿色:kinetochore protein CENP-B,红色:Alpha-tubulin,蓝色:DNA
Photo courtesy of: Dr. Alexey Khodjakov, Wadsworth Center, Albany NY  

  |  超分辨率显微镜专用物镜          

     超分辨率物镜(Super Resolution)针对最新超分辨应用专门研发。使用最新的光学设计并经过精心挑选,具备最少的光学相差与色差保重最为出色的光学性能。

CFI SR Apochromat TIRF 100x oil 
 

CFI SR Plan Apochromat IR 60x WI

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