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倒置显微镜多模块激光应用系统
Ti-LAPP 模块化照明系统 

具备终极灵活性与扩展性的模块化照明系统

      尼康Ti-LAPP系统提供全内反射(TIRF)、光活化/转化、光刺激与落射荧光的模块化照明装置。针对个性化的研究需要每一模块都可灵活构建专属的显微镜系统。例如,多个TIRF模块可整合到一个显微镜中用于不同实验和高速、多角度TIRF成像。配合尼康TI的分层光学结构,一台显微镜可同时搭配多达五个照明模块(如,两组TIRF,FRAP、DMD和落射荧光装置。)

Ti-LAPP模块化照明系统

 | DMD模块           

实现多点同时光活化

       全新DMD模块可实现任意形状任意位置的光活化或光转化,传统的FRAP组件只能进行单点手动调节的光活化。使用NIS-Elements软件对DMD照明的形状、大小、位置和数目进行自由定制。研究者可利用这一技术标记细胞群中的一部分或者单个细胞中的部分蛋白或者跟踪多细胞的迁移。DMD模块是光遗传学实验的绝佳选择,光遗传技术可以借助光线改变部分细胞或蛋白功能。DMD模块可以使用激光作为光源也可以使用更小光毒性的LED照明装置。

小鼠胚胎纤维原细胞共转mCherry标记的Lamin A(红)与左下部光转化的光敏GFP标记的Lamin A(绿),此转化通过DMD模块使用405nmLED光源进行。时间序列图像使用荧光照明进行。通过光活化某一区域的Lamin蛋白,您可以观察到局部区域的动态变化行为。

Image courtesy of Drs. Takeshi Shimi and Bob Goldman, Northwestern University Medical School

 | H-TIRF模块            

实现全自动TIRF调节与观察

        随着观察样品与条件的不同,TIRF观察的激光入射角度与焦点都有不同。调节入射角和焦点实现TIRF照明需要一定的技巧与经验。全新的H-TIRF模组通过检测反射光速自动调节对焦与入射角。这些自动调节动作通过NIS-Elements软件中的自动准直功能来完成。入射角度与渐逝区域的穿透深度可以分别保存并在不同实验中任意调用以满足拍摄的一致性。

       H-TIRF模组配备有渐变自然光强滤片,此滤片移入光路中可使TIRF照明变得均匀一致。

       使用H-TIRF照明器与渐变ND滤片对离体制备的荧光标记微观(TRITC与Alexa 647)与微观结合蛋白进行三色成像。不同波长的入射角实现自动调节。

 

 

Image courtesy of Melissa Hendershott and Dr. Ron Vale, University of California, San Francisco

        如不使用渐变ND滤片,则TIRF的照明会在视野中呈现中间亮四周暗的想象。使用渐变ND滤片则可获得均匀一致的照明。

        离体制备的双层膜结构,使用Alexa 488(绿)同Alexa 561(红)标记膜蛋白并使用H-TIRF照明器进行双色成像(双色TIRF)。蛋白聚集成簇并呈现点状的结构(上排)。

        下排显示488通道并以彩虹方式显示可清晰分辩左右有图像的差异。

        H-TIRF照明器用于不同波长入射焦的自动调节。

Image courtesy of Drs. Xiaolei Su and Ron Vale, University of California, San Francisco

 | FRAP模块            

分析细胞内蛋白动态变化

       使用FRAP模块,光漂白、光活化及光转化等实验可以与高帧率、高林敏度相机检测相结合。这一模块可对目标细胞的特定区域进行点刺激,在没有点扫描共焦显微镜的情况下提供高性价比的细胞内蛋白动态研究的方案。

小鼠胚胎成纤维细胞表达mCherry-lamin A,在右上角区域使用FRAP模块进行点状光漂白并研究lamin A分子的动态变化。时间序列图像使用落射荧光照明。

Image courtesy of Drs. Takeshi Shimi and Bob Goldman, Northwestern University Medical School

 | TIRF模块            

用于细胞膜动态及单分子观察

 

 

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